[摘要]：目的：探讨野生与栽培中药地骨皮中香草酸含量的差异。方法：采用高效液相色谱法(HPLC)对野生和栽培的中药地骨皮中的有效成分香草酸进行测定，采用KromasilODSC18(4.6mm×mm，2.5μm)，流动相为乙腈：1.0%冰醋酸水溶液(10∶90，用三乙胺调节pH值，pH=3.0)，温度为35℃，检测波长为nm，流速为1.0mL/min。结果：香草酸浓度在7.69~71.85μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.)，平均加样回收率为99.95%，RSD值为1.63%(n=6)，在线性关系内，栽培中药地骨皮中香草酸的含量高于野生地骨皮。结论：HPLC方法检测香草酸含量简便易行，稳定性高，重复性好，检测结果表明地骨皮的质量与生长环境有密切关系，从而为临床应用地骨皮提供参考依据。[关键词]：地骨皮；香草酸；栽培；野生地骨皮为茄科植物(LyciumchinenseMill)的干燥根皮或者是宁夏枸杞(LyciumbarbarumL.)的干燥根皮，在我国分布较为广泛，为临床上的常用中药。地骨皮性寒、味甘，收录于《中国药典》年版一部中。地骨皮具有良好的降血压、血糖以及血脂的功效。但是对于地骨皮中有效成分含量的测定报道较少，为了增加对地骨皮质量控制的科学借鉴依据，本研究选择了野生与栽培两种规格的地骨皮进行含量测定，以香草酸作为指标，比较两种地骨皮的质量含量，为含量控制提供依据。1试验仪器与试药1.1试验仪器：美国Waters公司生产的高效液相色谱仪(Waters色谱工作站，Waters紫外检测仪)，瑞士梅特勒-托利多公司生产的电子分析天平，海尔冰箱、干燥箱。1.2试药：香草酸对照品(购于中国药品生物制品检定所，批号：-)，地骨皮药材购于不同的省份，由专家鉴定为茄科植物枸杞或宁夏枸杞的干燥根皮；乙腈为色谱纯，水为三蒸水，其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件的选择：采用KromasilODSC18(4.6mm×mm，2.5μm)色谱柱，流动相为乙腈：1.0%冰醋酸水溶液(10∶90，用三乙胺调节pH值，pH=3.0)，温度为35℃，检测波长为nm，流速为1.0mL/min，进样量为15μL。理论塔板数。色谱图见图1。2.2对照品溶液的配制：称取香草酸7.96mg，精密称定，置于mL容量瓶中，加入甲醇溶液定容至刻度，摇匀后即得对照品溶液，常温放置，保存备用。2.3供试品溶液的配制：取同一批次中药地骨皮药材3.0g，过60目筛后取细粉约2.0g精密称定后置于圆底烧瓶中，加入甲醇溶液mL，置于75℃水浴锅中加热回流2.5h，放至室温后滤过，用45mL甲醇溶液分次洗涤过滤后的残渣，蒸干后残渣采用1.0mol/LNaOH溶液55mL溶解，再次移入圆底烧瓶，85℃水浴锅中加入回流4h，放至室温后移入分液漏斗，用浓盐酸调节溶液的酸性(pH=4.0)，乙醚溶液萃取3次，25mL/次，合并乙醚过滤液，挥发蒸干后用甲醇溶液溶解残渣，移入10mL容量瓶中采用甲醇溶液定容至刻度，即得供试品溶液，常温放置，保存备用。2.4线性关系考察：精密吸取香草酸对照品溶液1、2、4、6、8、10mL，分别置于20mL容量瓶中，甲醇定容至刻度后摇匀，得到不同浓度的对照品溶液，按照“2.1”项下的色谱条件各自进样，每次15μL，以峰面积积分值(Y)作为纵坐标，香草酸对照品浓度(X)作为横坐标绘制标准曲线，得到香草酸线性回归方程为：Y=0.X-1.(r=0.)，表明香草酸的浓度在7.69~71.85μg/mL范围内呈良好的线性关系。2.5精密度考察：精密吸取“2.2”项下的对照品溶液15μL，连续进样6次，记录峰面积，按照线性关系计算，对照品含量平均值为10.47μg/mL，RSD值为1.65%(n=6)，表明试验仪器的精密度良好。2.6重复性考察：取同一批中药地骨皮样品2.0g，共6份，精密称定后按照“2.3”项下的供试品溶液配制方式制备成供试品溶液，测定香草酸含量，平均含量为12.45μg/mL，结果RSD值为2.00%(n=6)，表明该测定方法的重复性较好。2.7稳定性考察：精密吸取同一供试品溶液适量，分别在0、2、4、6、8、10、12、14、18h内注入高效液相色谱仪，记录香草酸峰面积，结果RSD值为1.78%，表明溶液中香草酸含量在18h范围内性质稳定。2.8加样回收率试验：取已知含量的地骨皮样品6份，每份重量约为1.0g，精密称定后分别加入定量香草酸对照品，按照“2.3”项下供试品溶液的制备方法配制成供试品溶液后测定样品的含量，计算平均加样回收率，结果见表1。2.9样品含量测定：精密吸取各个批次及规格、产地的供试品溶液，按照色谱条件进行含量测定，以外标法计算样品中香草酸的含量，结果见表2。3讨论3.1提取条件的选择：本试验在提取过程中对甲醇、乙醇溶液作为提取剂的优势进行对比分析，进行水浴回流提取。地骨皮中脂溶性成分少，先用水提取，甲醇溶液提取，不同浓度的乙醇50%、55%、75%溶液提取，然后采用甲醇溶液溶解后进样，将上述提取物质提取后采用乙醚、醋酸乙酯分别进行萃取，结果表明，采用甲醇溶液的提取效果更好，乙醚萃取挥干后的成分含量与醋酸乙酯萃取后的成分含量更高，杂质的干扰更少。3.2提取方式的选择：提取药材过程中，分别采用了水浴锅加热回流提取、超声提取以及索氏提取方法，最后结果显示采用水浴锅加热回流提取更加完全，2.5h时提取完全。因此研究中采用水浴加热回流提取2.5h。3.3产地含量差异比较：不同产地栽培与野生地骨皮中香草酸含量的差异较大，相同省份药材中香草酸的含量在栽培及野生中的差异性较大，总体结果显示栽培地骨皮中香草酸含量高于野生地骨皮，因此在临床用药时多注重产地以及生长方式的差异，以期对地骨皮进行合理的应用。

参考文献：略

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